Introduzione
Il sistema di purificazione plasmidico MagPure utilizza la tecnologia delle perle paramagnetiche per la preparazione ad alta produttività di DNA plasmidico in copia elevata o in copia ridotta da cellule E. coli. Questo kit può essere utilizzato anche con costrutti basati su vettori fosmid e BAC.
Il sistema utilizza lisi alcalina seguita da una purificazione MagPure per legare differenzialmente il DNA plasmidico a perle paramagnetiche. Mentre il DNA è legato alle perle, i contaminanti possono essere risciacquati via usando una semplice procedura di lavaggio. Poiché MagPure utilizza la tecnologia di separazione magnetica, il protocollo non richiede filtrazione sotto vuoto. Questo rende il kit estremamente adatto all'automazione. Il DNA plasmidico purificato con questo sistema è più comunemente usato nel sequenziamento Sanger e nell'amplificazione PCR.
Specifiche
| Caratteristiche | Specifiche |
| Funzioni principali | Isolamento fino a 20μg di DNA plasmidico privo di endotossine da 1.5 ml coltura batterica |
| Applicazioni | Digestione enzimatica, sequenziamento, PCR e marcatura , ecc. |
| Tecnologia di purificazione | Tecnologia delle perle magnetiche |
| Metodo di processo | Manuale o automatico |
| Tipo di campione | Plasmide convenzionale, plasmide inferiore a 30 KB |
| Quantità campione | 1.5 ml |
| Volume di eluizione | ≥50μl |
| Tempo per esecuzione | ≤ 80 minuti |
Principio
Questo prodotto è basato sul metodo di purificazione di particelle magnetiche ad alto legame. Il campione viene lisato e digerito sotto l'azione del lisato e del lisozima. Il DNA viene rilasciato nel lisato. Dopo l'aggiunta di particelle magnetiche e di soluzione legante, il DNA verrà adsorbito sulla superficie delle particelle magnetiche, e le impurità come le proteine verranno rimosse senza adsorbimento.
Le particelle adsorbite sono state lavate con soluzione di lavaggio per rimuovere proteine e impurezze, lavate con etanolo per rimuovere i sali, ed infine il DNA è stato eluito mediante tampone di eluizione.
Vantaggi
| Contenuto | P181402 | P181403 | P181404 |
| Tempi di purificazione | 100 Prep | 500 Prep | 5000 Prep |
| RNasi A. | 10 mg | 50 mg | 2 x 250 mg |
| Buffer P1 | 30 ml | 150 ml | 2 x 800 ml |
| Buffer P2 | 30 ml | 150 ml | 2 x 800 ml |
| LEN3 buffer | 20 ml | 80 ml | 800 ml |
| Buffer LN4 | 60 ml | 300 ml | 3 x 900 ml |
| Buffer LN5 | 60 ml | 300 ml | 3 x 900 ml |
| Buffer GW1 | 53 ml | 352 ml | 6 x 440 ml |
| Lega cordone N | 4.8 ml | 24 ml | 3 x 72 ml |