Nome del prodotto
MagPure Stool
DNA
Kit
Specifiche del prodotto
D636401,48Prep/Kit
Introduzione
Il
kit MagPure Stool DNA LQ
è progettato appositamente per l'estrazione di DNA ad alta resa da campioni di feci. Può ottenere DNA microbico ad alta purezza da campioni di feci (≤200 mg). Questo kit è basato sulla purificazione di perle magnetiche e sull'esclusiva tecnologia di adsorbimento dei fattori di inibizione, senza estrazione con fenolo-cloroformio o precipitazione con alcol. Può assorbire efficacemente acido umico e altri fattori inibenti nella soluzione. Il DNA può essere utilizzato direttamente per applicazioni downstream quali PCR, test del DNA virale, test del DNA batterico, ecc.
I tamponi e il processo di purificazione MagPure LQ Kits sono progettati appositamente per le stazioni di lavoro automatiche per la manipolazione dei liquidi e per l'estrazione manuale.
Composizione principale
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Prodotto
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D6364
-01
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D6364
-02
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Preparazione per kit
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48
Prep
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96
Prep
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Particelle MagPure
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1.7
ml
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3.4
ml
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RNasi A.
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10
mg
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20 mg
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Proteinasi K
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24
mg
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48
mg
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Tampone di dissoluzione della proteasi
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1.8
ml
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5
ml
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ATL. Buffer
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60 ml
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120
ml
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PVP-10
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1.2 g
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2.2 g
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PCI buffer
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40 ml
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90 ml
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MLE* buffer
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30 ml
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60
ml
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Buffer
GW1
*
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44 ml
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110 ml
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Tampone di eluizione
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30 ml
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60 ml
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Protocollo
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1
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1
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Condizioni di conservazione e
validità
I
componenti del kit MagPure Stool DNA LQ
possono essere
conservati a temperatura ambiente
per 18 mesi (15~25ºC
)
.
Proteinasi K/RNasi A polvere liofilizzata, particelle MagPure e tampone PCI possono essere spediti a temperatura ambiente. Dopo la ricezione, conservare alle 2~8ºC
.
Materiali e attrezzature forniti dall'utente
Blocco riscaldante o bagno d'acqua in grado di
70ºC.
etanolo al 2.75% e al 100%
Aggiungere
tampone di dissoluzione della proteasi alla Proteinasi K,
la concentrazione finale è 20 mg/ml.
Conservare a -20
~8ºC
.
Aggiungere tampone di dissoluzione della proteasi alla RNasi A, la concentrazione finale è di 15 mg/ml. Conservare a -20~8ºC.
Diluire il tampone GW1 con etanolo al 100% e conservare a temperatura ambiente temperatura
Diluire il tampone MLE con isopropanolo e conservare a temperatura ambiente
7.le particelle magnetiche devono essere agitate violentemente per 1~2 minuti per essere omogenee prima dell'uso.
Protocollo
Preparazione del campione (lisi mediante perline)
Questo protocollo viene utilizzato per l'estrazione di DNA ad elevata purezza da
campioni di feci da 100~150 mg.
Trasferire 100~di campione di feci da 150 mg in
una provetta con perline da 2 ml. Per campioni liquidi, pipettare
~
campioni da 0,15 ml. Tagliare l'estremità della punta per pipette per facilitare il pipettaggio.
Aggiungere 0,6 ml di tampone ATL/PV-10 e 0,6 ml di buffer PCI nel
campione.
Collocare su una macchina per frusta o
agitare alla velocità massima
per 10 minuti
.
Si consiglia di utilizzare.FastPrep-24, Tissue Lyser, ECT. Il tempo di elaborazione dipende dall'ingresso del campione e dal batello.
Nota: Aggiungere polvere di PVP-10 nel tampone ATL prima dell'uso
, sciogliere completamente dal lato superiore verso il basso.
3.incubare il campione a
65ºC per
20 minuti. Questo passo rende i batteri lisi più completamente.
4.centrifugare a
13,000
x g per 5 minuti e seguire il processo di purificazione riportato di seguito.