Descrizione del prodotto
Nome del prodotto
Magpure Blood RNA Kit
Specifiche del prodotto
48 Prep/Kit
Introduzione
Questo prodotto fornisce una
semplice e rapida estrazione
dell'RNA totale
da
sangue, buffy coat, midollo osseo, sospensione cellulare e altri fluidi corporei.
Il kit è basato
sulla tecnologia di purificazione delle particelle superparamagnetiche, senza estrazione con fenolo-cloroformio o precipitazione con alcol.
L'intero processo di estrazione è di soli 60 minuti.
L'RNA purificato è pronto per
applicazioni downstream quali RT-PCR,
test di RNA virale
e così via.
I
tamponi MagPure RNA Kit possono essere utilizzati sia per il processo di estrazione manuale che per le macchine automatiche di estrazione degli acidi nucleici.
Questi kit sono adatti per l'estrazione di RNA da ≤ 5x106
sospensioni cellulari
,
200~300
µl
sangue intero, 200µl
buffy coat, 100µl
midollo osseo.
Composizione principale
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N. Cat
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R661101
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Tempi di purificazione
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48 Prep
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Particelle di RNA MagPure
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1.7 ml
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Proteinasi K
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24 mg
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Tampone di dissoluzione della proteasi
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1.8 ml
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DNasi i
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600 µl
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Tampone DNasi
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30 ml
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MLB buffer
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40 ml
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MCB buffer
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9 ml
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Buffer MW1
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22 ml
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Buffer MW2
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20 ml
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Acqua priva di RNasi
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10 ml
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Condizioni di conservazione e validità
Questo prodotto può essere conservato a temperatura ambiente (15~25°C
) per 12 mesi.
Le particelle di RNA Magpure, Proteinase K, DNasi i
vengono spedite
a temperatura ambiente. Dopo
la ricezione
,
conservare
la DNasi i a
-20ºC
~8ºC e conservare le particelle di RNA Magpure e la proteinasi K a 2.
Materiali e attrezzature forniti dall'utente
etanolo al 1.100%
Diluire il tampone MW1 e MW2 con etanolo al 100% e conservare a temperatura ambiente
Diluire il tampone MCB
con
conservarlo a temperatura ambiente
4.sciogliere la proteinasi K con tampone di dissoluzione della proteasi fino al
Proteinasi
K
e conservare
a -20
~8ºC
Kingfisher o simile isolamento estrattore:
Aggiungere i reagenti/campione al
pozzetto
della piastra a pozzetti profondi secondo la
tabella riportata di seguito.
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Nome della piastra
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Reagenti precaricati
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Aggiunta prima dell'uso
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Piastra campione
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Pipettare 20µl Proteinasi K e 30µl particelle di RNA MagPure
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Pipettare 150~300µl del campione nel pozzetto della piastra:
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200~300 µl sangue intero, plasma, siero,
fluidi corporei
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200µl di buffy coat o 150µl di midollo osseo
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Fino a 5 x 106
linfociti o cellule di coltura in PBS 200µl.
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Aggiungere 600µl MLB buffer
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Piastra di lavaggio 1
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600µl tampone MW1, inserire 96 punta magnetica
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DNasi
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290µl tampone DNasi e 10µl DNasi i
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Piastra di lavaggio 2
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600µl buffer MW2
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Piastra di lavaggio 3
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600µl buffer MW2
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Piastra di eluizione
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60µl acqua priva di RNasi
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2.posizionare un pettine a 96 punte per magneti a pozzetti profondi sulla piastra di lavaggio 1.
Avviare il protocollo R6611_Flex con KingFisher Flex 96 e caricare le piastre.
Aggiungere 450µl
di MCB tampone alla piastra DNasi durante la fase di erogazione.
5.posizionare nuovamente la piastra DNase nello strumento e premere Avvia. Dopo la pausa, il protocollo continuerà fino alla fine
6.al termine della sessione, rimuovere le piastre e conservare l'RNA totale purificato.
Guida alla risoluzione dei problemi
A:basse rese di RNA
1.
risospensione incompleta delle
particelle di MagPure
:
Risospendere le
particelle di MagPure mediante vortex prima dell'uso.
Perdita
di particelle MagPure durante la procedura
:
Fare attenzione a non rimuovere
le particelle MagPure durante la procedura.
3.particelle MagPure risospese durante il legame
:
Vorticare vigorosamente per 2 minuti dopo l'aggiunta di tampone MCB.
4.
l'eluato contiene etanolo residuo:
Assicurarsi che il flusso di lavaggio attraverso la provetta di raccolta sia scaricato e che la colonna sia quindi centrifugata a >12,000 x g per 1 minuto.
B:valore A260/A280 basso
1.acqua utilizzata per diluire RNA per la misurazione A260/A280:
Utilizzare 10 mm di Tris·Cl, pH 7.5, non acqua priva di RNasi, per diluire il campione prima di misurare la purezza
.
Foto dettagliate
Certificazioni
Laboratorio
Officina
Area prodotti finiti